集的竟达两万余人，“为从来所未有”。
由于征战频繁，加上受党内“左”倾错误的影响，工农革命军的烧杀行为和侵犯群众利益的事仍时有发生。1928年3月下旬，为了接应和掩护朱德部队上井冈山，毛泽东亲率工农革命军第一团前往桂东、汝城。抵达桂东沙田后，工农革命军积极开展群众工作，收到巨大成效。但是也出现了一些侵犯群众利益的事情和烧杀行为：有一次烧土豪的房子时，殃及旁边的老百姓房子；打土豪时，出现了把老百姓娶媳妇的新嫁奁误当成土豪财产予以没收，把给挨户团队长做过事的木匠也抓起来等事情。
毛泽东对此十分愤慨。他严厉批评了这种行为，指出要执行我军的一贯政策，不要被那些“左”的倾向扰乱了视线。他对部队的干部战士说：“烧房子有什么用。要消灭的是封建剥削思想、反动势力。房子留下来，革命胜利以后，还可以用来办学嘛。”
为了彻底纠正这种现象，4月3日上午，毛泽东把部队集中在桂东沙田圩后的老虎冲三十六担丘的田中，向工农革命军一团全体指战员正式颁布了“三大纪律、六项注意”。
毛泽东严肃地说：“烧房子这类事情行不通，烧了房子，老百姓都走了。现在要颁布几条纪律。第一条，一切行动听指挥；第二条，不拿工农一点东西；第三条，一切缴获要归公。六项注意：一，上门板；二，捆稻草；三，说话和气；四，买卖公平；五，借东西要还；六，损坏东西要赔。”
在这里，毛泽东根据情况的变化，将荆竹山宣布的三大纪律中“不拿老百姓一个红薯”改为“不拿工农一点东西”；将遂川宣布的六项注意中“不拉夫”、“不打人骂人”改为“借东西要还”、“损坏东西要赔”。
对三大纪律六项注意，毛泽东一条一条地向指战员作解释。针对“损坏东西要赔”这一条，他对大家说：打破了群众的一只水缸，赔他一只新缸，虽然新缸不如旧缸光滑，但是，赔总比不赔要好，群众会满意的。他叮嘱大家回去后要把三大纪律六项注意背得滚瓜烂熟，严格遵守，谁也不得违犯。
这是毛泽东创建井冈山根据地以来第一次比较完整地颁布工农革命军的“三大纪律、六项注意”。
为了使广大战士容易记住，开始在部队中教唱《红军纪律歌》，歌词是：上门板，捆铺草，房子扫干净。
说话要和气，买卖要公平。
损坏东西要赔偿，借人东西要还清。
毛泽东不仅提出了“三大纪律、六项注意”，还亲自督促执行。张令彬回忆说：“当时，他随部队一起行动，在情况许可下，出发时他总是跟在后卫部队检查我们有没有上好门板，捆好稻草，问住的这家姓什么，家庭情况，烧了房东的柴没有，水缸里的水挑满没有，地扫干净了没有。连给房东的钱放在什么地方，他都会问。他说一定要放在恰当的地方，别让别人拿走了。”
“三大纪律、六项注意”是人民军队的基本法则。它集中体现了人民军队军民一致、秋毫无犯的新型军民关系，成为人民军队建军原则的重要组成部分。它对于人民军队的建设，对于正确处理军队内部特别是军民之间的关系，对于团结人民群众和瓦解敌军，都起到了重要作用。
随湘南起义部队上井冈山的曾志有过这样的回忆：“上山以前，我就听说毛主席的部队纪律严明。我们湘南来的部队一部分是旧军队中来的，另一部分是从农村来的。战士组织松散，打起仗来还有人有发洋财的思想。记得在郴州时，我曾见过朱总司令队伍中有些从旧军队中来的某些战士就有这样的情况，他们打到一个地方，就在那里的一些大商店抄抢，随便吃，随便拿。毛主席认为要把队伍锻炼成坚强的革命力量，非要建立严格的政治工作制度不可。我们到井冈山两三天后，到了小井，在那里参观了一个小小的展览。小井的街面很窄，只有几个店面。我们走进一个小铺子，那里摆了一些东西：有几根针、几条线、几个红薯、几双袜子、几双鞋子、几张纸、几束禾草……旁边写上个说明，解释说：这些东西哪怕是一根针、一个红薯都不能拿；为了说明到老百姓家里借东西要还，打破东西要赔，旁边还摆了一块门板、一个破坛子、一个破碗；为了说明红军要帮助孤寡老弱的老百姓挑水、扫地，旁边就摆了一个水桶、一把扫帚。总之，东西不多，都是一些实物，把三大纪律、六项注意的内容逐一表达出来了。这些东西，经常摆在那里，让部队随时都可以去看。”
“三大纪律、六项注意”的颁行，使红军的纪律出现了根本的改观。当时，部队在行军过稻田时，都要派一个人在前面开路，遇到倒在田埂上的稻子，走在前面的人都要负责将其扶到田里，不可踢或者踩上稻子，否则，就是违反了群众纪律。
执行纪律到了如此程度，还有什么军队能与之相比？
这样的军队自然受到了井冈山老百姓的衷心欢迎，他们编了一首顺口溜予以赞扬： 红军纪律真严明，行动听命令，爱护老百姓，到处受欢迎。
“三大纪律、六项注意”的内容，在革命战